PCR實驗室出現(xiàn)污染的原因

PCR實驗室又稱基因擴增實驗室。它利用分子生物學技術對核酸片段進行擴增，也可以看作是一種特殊的核酸體外復制。采用基因追蹤系統(tǒng)對人體內(nèi)容進行掌握，檢測精度可達納米級?，F(xiàn)在PCR技術已經(jīng)廣泛應用于傳染病、腫瘤靶向、生殖遺傳學等領域，但由于該技術對待測核酸進行了大量的多重檢測，甚至是少量的污染 很容易造成假陽性結果。其次，PCR實驗室要求比較高，實驗過程復雜。如果中間環(huán)節(jié)有遺漏，可能會造成假陰性結果。

在PCR實驗過程當中很容易發(fā)生污染。造成污染的主要原因有四個：

1、PCR產(chǎn)物污染。它也是PCR實驗室污染的常見原因。PCR產(chǎn)物經(jīng)過反復擴增后，拷貝量遠遠高于PCR的檢測限，因此即使是少量的污染也足以造成假陽性檢測結果。

2、試劑污染。在試劑制備過程當中，試劑因接觸受污染的容器、移液器、移液器吸頭、溶液等而受到污染。

3、待測樣品被污染。放置樣品的容器被污染或由于容器密封性不好造成樣品與外界的接觸被污染；其次，在核酸提取過程當中使用了被污染的移液器或移液器吸頭，造成PCR實驗室受到污染；另外，有些樣品含有雜質(zhì)，如果它們散落在空氣中，可能會發(fā)生交叉污染。

4、氣溶膠污染。如果氣溶膠含有病毒和其他污染物并擴散到空氣中，很可能會污染PCR實驗室。氣溶膠是由空氣和液體表層之間的摩擦產(chǎn)生的。打開蓋子，搖晃反應管，反復抽吸污染進樣器的樣品會形成氣溶膠，造成交叉污染。根據(jù)計算，一個氣溶膠粒子可以包含48000個拷貝。因此，應特別注意氣溶膠造成的污染。

只要PCR實驗室被污染，之前的結果報告就無效，不可進行其他的實驗操作。因此，必須找到污染源并徹底清除，才能獲得準確有效的實驗結果。