PCR實驗室建設四要素

　　PCR實驗室建設四要素

　　1、試劑制備區(qū)

　　用于制備檢測試劑，該區(qū)域處于正壓狀態(tài)，目的是避免污染物外溢。 該區(qū)域內部可分為三個區(qū)域：普通提取試劑制備區(qū)、PCR試劑制備區(qū)和PCR主反應液制備區(qū)，在常用提取試劑制備區(qū)，準備一些樣品核酸提取所需的裂解液和提取液; PCR試劑制備區(qū)用于PCR試劑的制備和儲存。 例如，準備引物、探針和其他 PCR 試劑，為避免交叉污染，避免反復凍融，應將試劑儲存液平均到一個較小的工作體積，儲存在這個房間內以備后用：PCR主反應液制備區(qū)將進行主反應液( 除樣品外。所有 PCR 所需試劑的混合)加入 PCR 管中。 重要提示：請勿將其他房間的材料(包括擴增、模板和目標核酸或陽性對照、耗材或設備)帶入試劑制備區(qū)。

　　2、制樣區(qū)

　　該區(qū)無壓力設置要求，該區(qū)域用于分割樣品、碾磨、壓碎和均質樣品。 由于在這些粉碎、碾磨和均質過程當中會產生氣溶膠，因此陽性樣品可能會污染后續(xù)操作，該區(qū)域應與后方區(qū)域嚴格分開，并應放置在與后方三個區(qū)域分開的單獨房間內，樣品制備區(qū)還可以設置專門的封閉區(qū)域或房間，用于樣品接收和儲存。 該房間可以放置在冰箱中用于樣品儲存，并應與樣品制備區(qū)的其他區(qū)域分開，樣品制備區(qū)的人員不得進入試劑制備區(qū)。

　　3、核酸提取區(qū)域

　　核酸提取區(qū)域是樣品核酸提取區(qū)域，該區(qū)域處于負壓狀態(tài)，目的是避免核酸外溢造成污染，樣品制備區(qū)還包括從樣品中提取和純化核酸的區(qū)域和向裝有PCR的主反應混合物管中加入核酸的操作區(qū)。 添加樣品后，盡快關閉 PCR 管蓋，使用PCR板和塑料蓋板時，陽性對照和含有目標序列的樣品應與待測樣品分開操作，以免加入模板時交叉污染。

　　重要提示：該房間內的所有物品不得帶入試劑準備區(qū)。

　　4、擴增和產物檢測區(qū)域

　　此區(qū)域用于 PCR 擴增和 PCR 分析，PER 儀表放置在該區(qū)域。 房間保持負壓，避免核酸外溢，該區(qū)域的人員必須始終穿著工作服

　　和手套，并在離開房間前脫下，以避免擴增子污染其他位置，用于放大和產品測試的所有設備都應指定給這個房間。